Основными компонентами «холодовой цепи» являются:

Специально обученный персонал по обслуживанию холодильного оборудования, правильное хранение вакцин и снабжение ими нижестоящих организаций;

Холодильное оборудование, обеспечивающее хранение и транспортирование вакцин в оптимальных температурных условиях;

Система контроля за соблюдением температурного режима на всех этапах «холодовой цепи», четвёртым (последним) уровнем которой являются участковые больницы, амбулатории, детские и взрослые поликлиники, родильные дома, ФАП.

Система «холодовой цепи» состоит из 4 уровней:

1 уровень включает путь продвижения препарата от организаций-изготовителей МИБП до аптечных складов в субъектах РФ;

2 уровень включает транспортировку препарата от аптечных складов в субъектах РФ до городских и районных (городских и сельских) аптечных складов, а также складов организаций здравоохранения;

3 уровень включает транспортировку препарата от городских и районных (городских и сельских) аптечных складов до ЛПУ (участковых больниц, амбулаторий, поликлиник, родильных домов, ФАПов и др.);

4 уровень организуется ЛПУ (участковыми больницами, амбулаториями, поликлиниками, родильными домами, ФАПами и др.).

Таким образом, в прививочном кабинете должны быть организованы мероприятия по соблюдению температурного режима хранения и применения МИБП в соответствии с требованиями, предъявляемыми к 4-му уровню «холодовой цепи».

На всех уровнях «холодовой цепи» должна строго проводиться регистрация поступлений и дальнейшего отправления вакцин с фиксацией их количества, номеров серий, форм выпуска, срока годности, даты поступления, Ф.И.О. ответственного работника. Регулярно (не реже 2-х раз в сутки) в специальном журнале фиксируется температура хранения (термометры располагают на верхней и средней полках холодильника) и показания термоиндикаторов.

Данную работу проводит назначенный приказом сотрудник с чётким определением его служебных обязанностей. В каждом учреждении, где хранятся вакцины, должен иметься план экстренных мероприятий на случай возникновения проблем в холодовой цепи, утверждённый его руководителем.

При определении режима транспортирования и хранения каждого отдельного МИБП следует руководствоваться инструкциями по применению данного препарата.

В холодильнике вакцины следует располагать таким образом, чтобы к каждой упаковке был обеспечен доступ охлаждённого воздуха и чтобы препарат, имеющий меньший срок годности, использовался в первую очередь. При температуре 2-8 0С следует хранить вакцины, анатоксины, иммуноглобулины и гетерологичные сыворотки. Если живые вакцины хранятся замороженными, то только при температуре –20 0С; допускается временное (не более 48 ч) повышение температуры до 2-8 0С при их транспортировке. Срок годности вакцин, хранимых при минусовой температуре, тот же, что и хранимых при температуре 2-8 0С. Исключение составляет ОПВ, срок годности которой при температуре –20±1 0С составляет 2 года, а при температуре

Не допускается замораживание адсорбированных препаратов (вакцины против гепатита В, коклюшно-дифтерийно-столбнячной вакцины, дифтерийно-столбнячного анатоксина и др.) при транспортировании и хранении.

Для повышения устойчивости живые вирусные вакцины выпускают с термостабилизатором, однако это не означает возможность нарушения режима хранения.

Растворитель для вакцин также целесообразно хранить в холодильнике (но не в морозильной камере! Его замораживание не допускается), чтобы при растворении вакцины не вызвать повышения температуры последней. В морозильном отделении необходимо иметь запас замороженных хладоэлементов. Длительность хранения вакцины в учреждениях первичного звена (на 4-м уровне «холодовой цепи») не должна превышать 1 месяц. Следует максимально ограничить открывание дверцы холодильника, поскольку даже за 30 секунд температура в холодильнике повышается на 8 0С, и для снижения её до исходной величины требуется около получаса. По этой же причине МИБП не рекомендуется хранить на дверце холодильника. Каждый препарат должен находиться в отдельной коробке с чёткой маркировкой.

Вакцина из многодозных флаконов может использоваться в течение рабочего дня в соответствии с инструкцией по её применению при соблюдении следующих условий:

Забор каждой дозы вакцины из флакона осуществляется с соблюдением правил асептики;

Вакцины хранятся при соответствующей температуре (от +2 0С до +8 0С);

Восстановленные вакцины используются немедленно и хранению не подлежат.

Открытые флаконы с вакциной в конце рабочего дня уничтожают в соответствии с установленными требованиями.

Биологические препараты - средства биологического происхождения, применяемые в профилактических, диагностических и лечебных целях. Промышленность выпускает также и стимулирующие биопрепараты: иммуностимуляторы, кормовые антибиотики, гормоны, витамины.

Средства иммунопрофилактики. К ним относят вакцины, глобулины сыворотки. Основные показатели хорошего качества всех профилактических препаратов - стерильность или чистота (отсутствие контаминантов), безвредность, допустимая степень реактогенности, антигенная активность и иммуногенность, эпизоотическая эффективность.

Штаммы микроорганизмов, применяемые для изготовления вакцин, должны быть классифицированы, клонированы и представлять собой однородную популяцию микроорганизмов с характерными морфологическими, биохимическими и антигенными признаками.

Живые вакцины содержат культуру микроорганизмов аттенуированного штамма, сохранивших высокую иммуногенность с генетически закрепленной пониженной вирулентностью. Получают методом направленного изменения свойств возбудителя под воздействием внешней среды (вакцины против сибирской язвы, туберкулеза, бруцеллеза) или путем пассажей через организм невосприимчивых животных (вакцины против бешенства, рожи свиней). Живые вакцины наиболее перспективны для ветеринарной практики, так как иммунитет после их применения образуется, как правило, раньше и характеризуется большей напряженностью и длительностью.

Инактивированные вакцины содержат культуру микроорганизмов определенного вида, обезвреженных действием физико-химических факторов (высокая температура, ультрафиолет, фенол, формалин) и утративших способность к репродуцированию (без убого разрушения клетки микроорганизма, с сохранением иммуногенных свойств возбудителя). Инактивированные вакцины по иммуногенности уступают живым, поэтому их вводят в больших дозах и многократно. Чтобы повысить иммунологическую эффективность инактивированных вакцин, используют депонирующие вещества (адъюванты), которые по механизму действия на антиген делят на сорбирующие и эмульгирующие.

Анатоксины- вид вакцин, применяемых для активной профилактики токсикоинфекций животных. Получают методом обезвреживания бактерийных экзотоксинов 0,3...0,4%-м формалином с выдерживанием при 38...40 "С в течение трех-четырех недель. Анатоксины стимулируют синтез антитоксинов, которые, нейтрализуя экзотоксины возбудителя, не оказывают губительного действия на него самого. Широко используют поливалентный анатоксин против клостридиозов овец - инфекционной энтеротоксемии, брадзота, некротического гепатита, злокачественного отека овец и дизентерии ягнят.

Вакцины нового поколения - субъединичные, генно-инженерные - созданы с помощью методов биотехнологии.

По технологии изготовления вирусные вакцины делят на тканевые культуральные (лапинизированные) и эмбриональные - изготовленные из различных тканей животных, организм которых был использован в качестве среды размножения возбудителя.

В зависимости от примененного инактиватора все вакцины подразделяют на феноловые, формоловые, спиртовые, гретые; от добавленного адъюванта - на квасцовые (адсорбированные на алюмокалиевых квасцах), гидроокисьалюминиевые и масляные.

В зависимости от количества антигенов вакцины подразделяют на моновалентные - содержащие один антиген одного штамма (серотипа, биотипа) возбудителя данной болезни; поливалентные - содержащие антигены различных серотипов (биотипов, штаммов) возбудителя данной болезни; ассоциированные - содержащие антигены возбудителей нескольких заболеваний;

Аутогенные - приготовленные из штамма микроорганизма, выделенного от больного животного, и для него же предназначенные.

Кроме того, выпускают вакцины жидкие и сухие - изготовленные в основном из живых слабоустойчивых штаммов, высушенные в условиях глубокого вакуума после предварительного замораживания (лиофилизация) или другим методом.

Прививки бывают профилактические (плановые) и вынужденные (при угрозе заноса возбудителя инфекции в хозяйство или появлении в хозяйстве инфекционной болезни).

Противопоказаниями против прививок служат: наличие в хозяйстве остроинфекционных болезней, а также переболевших животных (реконвалесцентов), истощенных или животных с повышенной температурой тела; неблагоприятные погодные условия;

Стресс-факторы; последняя стадия беременности, первые 2 нед после родов; прививки другой вакциной.

Неспецифический нормальный глобулин содержит комплекс у - и Р-глобулинов. Стимулирующе действует на организм животных, повышая его общую устойчивость к неблагоприятным факторам внешней среды.

Лечебные и диагностические препараты. К средствам специфической терапии относят гипериммунные сыворотки (по механизм действия делят на антитоксические, антибактериальные и противовирусные), сыворотки реконвалесцентов, иммуноглобулины, бактериофаги, антибиотики, пробиотики. Для диагностических целей в ветеринарии используют сыворотки, иммуноглобулины, аллергены, бактериофаги, антигены, моноклональные антитела.

Антибактериальные сыворотки воздействуют непосредственно на возбудителя заболевания, подавляя его жизнедеятельность. Биопромышленность нашей страны выпускает сыворотки против сибирской язвы, рожи свиней, пастереллеза и др.

Антитоксические сыворотки содержат антитела (иммуноглобулины), способные специфически связывать и нейтрализовывать токсины бактериального, растительного и животного происхождения. В ветеринарии применяют антитоксические сыворотки против анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец, столбняка, ботулизма, злокачественного отека и др.

Противовирусные сыворотки высокоэффективны, особенно в начале заболевания. Биопромышленность выпускает сыворотки против болезней крупного рогатого скота (ринотрахеит, вирусная диарея и др.), собак (чума, гепатит, энтерит).

Лечебные, профилактические и диагностические гипериммунные сыворотки обычно получают от лошадей, иногда - от волов, свиней. После окончания гипериммунизации, когда в сыворотке крови животного установлено максимальное содержание специфических антител, у животного берут кровь (чаще на 7...10-й день после последнего введения антигена). Кровь сепарируют, чтобы получить нативную плазму (сыворотку), которую отстаивают и стабилизируют (консервируют), затем концентрируют, стандартизируют, стерилизуют фильтрацией и при необходимости прогревают.

После производственного контроля каждую серию сыворотки проверяют на стерильность, безвредность, специфическую активность.

На бактериальную стерильность контролируют высевами из препарата на специальные питательные среды (МПА, МПБ с глюкозой, МППБ под маслом и агар Сабуро или среду Чапека, чтобы исключить контаминацию грибковой микрофлорой).

Безвредность проверяют на лабораторных животных в соответствии с нормативной документацией по изготовлению сыворотки. Животные должны оставаться здоровыми, без заметной местной и общей реакции в течение 10 дней.

Специфическую активность определяют в реакциях биологической и серологической нейтрализации. Реакцию биологической нейтрализации ставят на восприимчивых лабораторных животных, эмбрионах птиц или культурах клеток. Для серологического тестирования применяют РН, РДП в агаровом геле, РТГА, РСК, РНГА и др. с использованием в качестве контроля заведомо известных позитивных и негативных сывороток (референс-препаратов).

Кроме того, проверяют превентивные свойства лечебных и профилактических сывороток на восприимчивых животных. Чтобы определить активность сыворотки, ее вводят животным внутрибрюшинно, подкожно или внутримышечно. Затем через 20...24 ч инъецируют подтитрованную дозу вирулентного контрольного штамма соответствующего микроорганизма. Подопытные животные должны оставаться здоровыми не менее 14 дней, контрольные- погибнуть или заболеть.

Сыворотки реконвалесцентов (противовирусные и антибактериальные) получают от животных, переболевших инфекционной болезнью без осложнений. Сыворотку рекомендуют получать и использовать в условиях одного хозяйства. Кровь от животных-доноров можно брать непосредственно в хозяйстве или на мясокомбинате во время их убоя. Сыворотки реконвалесцентов применяют при парагриппе, вирусной диарее крупного рогатого скота, сальмонеллезе, пастереллезе и т. д.

Лечебные глобулины (против болезни Ауески сельскохозяйственных животных и пушных зверей, сибирской язвы) представляют собой водный раствор у - и р-глобулинов сыворотки крови животных. Иммуноглобулины получают различными методами (риваноловым, спиртовым и путем осаждения сульфатом аммония) из гипериммунных сывороток.

Бактериофаги-вирусы, которые проникают в бактериальную клетку, размножаются в ней и лизируют ее с выходом фаговых частиц в окружающую среду. Бактериофаги способны лизировать только определенные микроорганизмы. Введенный в организм бактериофаг сохраняется в нем 5...7 дней (прием бактериофага не может заменить вакцинацию). В нашей стране выпускают бактериофаги против сальмонеллеза или колибактериоза телят, пуллороза - тифа птиц.

Для идентификации возбудителей болезней в бактериальных культурах и свежем патологическом материале биопромышленность выпускает: сибиреязвенный бактериофаг К-ВИЭВ. «Гамма-МВА», ВНИИВВиМ, лиофилизированные бактериофаги для идентификации возбудителей листериоза, стафилококковые - для типирования штаммов; бруцеллезный бактериофаг.

Диагностические сыворотки используют не только для идентификации возбудителя инфекции, но и для определения его типа и варианта. Производство диагностических сывороток строго регламентировано, что обусловливает их высокое качество и стандартность. В большинстве случаев продуцентами названных сывороток служат лабораторные животные (кролики, морские свинки), петухи и редко-лошади.

Глобулин диагностический (для диагностики бешенства в пряпом методе иммунолюминесцентной микроскопии) -это чистая у-глобулина, выделенного из высокоактивной моноспецифической антирабической сыворотки лошадей и химически вязанного с изотиоцианатом флуоресцина. А/глергены представляют собой фильтрат убитых бактериальных клеток или извлеченных из них активных фракций: туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих, ППД для птиц, комплексный аллерген из атипичных микобактерий (КАМ); бруцетин ВИЭВ; маллеин.

Аллергическая диагностика основана на повышенной специфической чувствительности зараженного организма к определенным аллергенам - веществам бактериального происхождения, введение которых одним из методов (внутрикожно, подкожно или на слизистую оболочку глаза) больному животному, особенно в латентный период, вызывает местную реакцию.

Антигены- это вещества, способные при введении в организм вызывать в нем иммунологические реакции: синтез антител, формирование клеточной гиперчувствительности и др. Антиген реагирует с образовавшимися антителами как в живом организме, так и в пробирке.

Для серологических реакций выпускают: единый бруцеллезный антиген для РА, РСК и РДСК; бруцеллезный Розбенгал антиген; паратуберкулезный, листериозный, сапной, кампилобакте-риозный, лептоспирозный антигены и т. д.

Правила транспортировки биопрепаратов. Поскольку качество биопрепаратов снижается и даже полностью теряется при промерзании, под воздействием высокой температуры, повышенной влажности, прямого солнечного света, биопрепараты нужно как транспортировать, так и хранить в соответствующих условиях (очень важно это соблюдать по отношению к живым, особенно жидким, вакцинам).

Ветеринарные биопрепараты хранят в сухом темном помещении при температуре 2...10 °С; перевозят всеми видами транспорта в соответствии с правилами перевозки скоропортящихся грузов и багажа. При длительной транспортировке используют закрытые рефрижераторные вагоны (кузова, контейнеры), оснащенные холодильными установками или холодильными камерами при температуре от 2...5 до 8...10 °С. Для каждого препарата оборудуют отдельное место. При этом нарушение целостности упаковки и попадание влаги, а также даже однократное замораживание жидких биопрепаратов недопустимы.

Требования, предъявляемые к биологическим препаратам. Биопрепараты выпускают в ампулах и флаконах различного объема. На каждой ампуле или флаконе должны быть наклеены этикетки, содержащие следующую информацию:

Наименование и местонахождение предприятия-изготовителя;

Название препарата;

Количество препарата с указанием активности в единицах;

Состав препарата, если он поливалентный;

Номер серии;

Номер государственного контроля;

Срок годности препарата и дата его изготовления.

В каждую упаковку вкладывают наставление по применению препарата, утвержденное Департаментом ветеринарии МСХ РФ. Все биопрепараты должны быть изготовлены в соответствии с определенными ГОСТом, ТУ и пройти обязательный государственный контроль.

Во время транспортировки и хранения препарат может испортиться, поэтому перед применением его обязательно тщательно осматривают.

Препарат непригоден для использования в следующих случаях:

Отсутствует этикетка (надпись на флаконе) или не указан номер серии и (или) контроля;

Отсутствует наставление по применению;

Нарушена укупорка флакона, целостность флакона (ампулы, пробирки и пр.);

Промерзла жидкость во флаконе (для жидких препаратов);

Изменен обычный внешний вид (цвет, консистенция, запах и т. д.);

В содержимом флакона присутствуют пленки, хлопья, плесень, комочки, сгустки или осадок, не разбивающийся при встряхивании;

Истек срок годности препарата.

Правила использования биопрепаратов. Перед использованием упаковки проверяют этикетку и обращают внимание на номера серии и контроля, а также внешний вид препарата. Уточняют правила его использования (по наставлению) и дозировку.

Жидкие препараты, содержащие депонирующие вещества (квасцы, ГОА, масляный адъювант и т. п.), тщательно встряхивают до получения равномерной взвеси.

При растворении сухих препаратов применяют только указанный в наставлении растворитель (разбавитель). Чаще всего это стерильная дистиллированная вода.

Живые вакцины не содержат консервантов, поэтому при их вскрытии необходимо соблюдать правила антисептики и избегать попадания в препарат дезинфицирующих средств.

Вскрытые флаконы должны быть использованы в этот же день. Неиспользованные препараты утилизируют кипячением.

По истечении срока годности препараты бракуют или отправляют (если осталось много) на повторный контроль во ВГНИИКСС (в этом случае срок годности может быть продлен).

Биопрепараты выбраковывают комиссионно, составляют акт. Выбракованные препараты утилизируют автоклавированием или кипячением.

Вакцинами называют препараты, приготовленные из микроорганизмов - возбудителей той или иной инфекциинной болезни или приготовляемые из продуктов жизнедеятельности этих микроорганизмов.

Основной целыо применения вакцин является создание невосприимчивости, или иммунитета, к какой-либо инфекционной болезни, что обусловливается усилением защитных свойств организма вследствие появления в крови веществ, носящих название антител. Одни из антител действуют нейтрализующе па яды (токсины), выделяемые микробами в организме больного, другие же ведут к гибели самих микроорганизмов.

Большинство микробных вакцин представляет собой взвеси из убитых микробов, но имеются вакцины, состоящие из взвеси живых, микробов ослабленных теми или иными методами.

Для иммунизации против заболеваний, вызываемых фильтрующимися вирусами (еще более мелкими микроорганизмами, нежели бактерии), вакцины изготовляют из пораженных элементов ткани животного, заражеиного соответствующим иирусом. Сюда относится оспенный детрит, состоящий из вещества оспенных пустул коров или телят и содержащий ослабленный вирус оспы, и антирабическая вакцина, состоящая из тканевых элементов мозга кролика, пораженного вирусом бешенства, ослабленного теми или иными физическими или химическими методами.

Вакцины, приготовленные из нескольких штаммов культур, выделенных от нескольких больных соответствующей инфекцией, вссят название поливалентных вакцин в отличие от моновалентных вакцин, какими являются аутовакцииы, изготовляемые из культуры, выделенной из одного штамма микроба. Культуры для приготовления вакцин готовят выращиванием на питательных средах из агар-агара или бульона. Выращенные культуры затем умерщвляют воздействием или температуры (56-60°), или химических веществ (фенол, формалин, эфир).

Взвеси убитых микробов разводят физиологическим раствором поваренной соли до определенного содержания микробных тел в 1 мл по оптическому стандарту госконтроля.

Испытание вакцины . Вакцины испытывают: 1) на стерильность, т. е. отсутствие роста при посеве ее на питательные среды; 2) на соответствие определенному для каждого вида вакцин стандарту; 3) на безвредность путем нрививки животному.

Этот контроль осуществляют сначала на производстве, а затем в Государственном научно-контрольном институте.

По внешнему виду вакцины, приготовленные из взвеси микробных тел, представляют собой равномерно мутную белесоватую жид кость со слабым желтоватым или сероватым оттенком.

Микробные тела при хранении вакцины могут оседать на дно ампулы в виде беловатого осадка, над которым остается бесцветный физиологический раствор. Осевшая взвесь при встряхивании ампулы должна давать равномерную муть.

Каждую ампулу вакцины снабжают этикеткой. На этикетке обозначают: название института, название вакцины, номер серии, дозу, время изготовления, количество микробных тел в 1 мл (стандарт), номер госконтроля и срок годности. Помимо того, ампулу завертывают в печатное наставление по употреблению данной вакцины.

Признаки негодности вакцины . Изменение нормального внешнего вида, т. е. изменение цвета, резкое помутнение или, наоборот, просветление, наличие посторонних частиц (например, плесени), наличие комочков, не разбивающихся при встряхивании ампул, нарушение целости ампул, отсутствие этикетки.

Хранение . Вакцины сохраняют в сухом, защищенном от света месте при температуре от + 2° до + 12°.

Помимо вакцин, для подкожных прививок применяют вакцины для прививок через рот. Эти вакцины (тифозная, холерная, дизентерийная) приготовляют также из убитых микробов или в виде жидких вакцин, подобных подкожным вакцинам, но с ббльшим содержанием микробом в 1 мл, или в виде таблеток, которые состоят из микробов, высушенных при температуре не выше 45°, и наполнителя.

Кроме того, бактериальные вакцины разделяют на простые вакцины, или моновакцины, если вакцина приготовлена из культур одного вида возбудителя болезни (например, брюшнотифозная вакцина), и сложные, если в состав вакцины входят возбудители нескольких болезней, причем при возбудителях двух болезней (например, тиф и паратиф) вакцина получает название дивакцины, трех (например, тиф, паратиф В и паратиф А) - тривакцины, четырех - тотравакцииы и т. д.

Помимо профилактических прививок, вакцины применяют и с лечебной целью, например, гонококковую вакцину, стафилококковую, коклюшную вакцину.

Кроме вакцин, состоящих из микробных тел, применяют препараты, приготовляемые из продуктов жизнедеятельности микробов - токсинов, антитоксинов и антивирусов,

Эти препараты получают путем фильтрования бульонных 8-15-суточных культур Микробные тела остаются на фильтре, а продукты их жизнедеятельности проходят в фильтрат. Скарлатиноз- нострелтококковый токсин применяют для прививок в разведенном виде, а дифтерийный и столбнячный токсины обрабатывают формалином при 40° в течение 21-30 дней. В результате такой обработки токсины теряют ядовитость.

Полученные препараты называют анатоксинами и применяют для прививок против соответствующих инфекций.

Эти препараты после приготовления подвергают контролю, помимо стерильности и безвредности, на наличие иммунизирующих свойств в опытах на животных и титруют по стандартным сывороткам. Титры обозначают в виде иммунизирующих единиц (ИЕ).

Анатоксины, как и бактериальные вакцины, подлежат государственному контролю.

Признаки негодности и хранение такие же, как и у вакцин.

В последние годы стали применять так называемые ассоциированные вакцины, составленные из микробных вакцин и анатоксинов, например, из вакцины брюшного тифа и паратифа В и столбнячного анатоксина.

Прививки этими вакцинами вызывают одновременную выра ботку иммунитета к нескольким инфекциям, как показали эксперименты на животных и опытные прививки на людях.

Антивирусы - фильтраты многодневных бульонных культур микробов, в которых эти микробы больше не размножаются. Без дальнейшей обработки и после контроля на стерильность применяются в виде примочек и компрессов для лечения гнойных заболеваний (стрептококковых и стафилококковых) или в виде орошения носоглотки (гриппозный антивирус). Срок годности - 2 года со дня изготовления.

Внешний вид описанных препаратов, за исключением ассоциированных вакцин, - прозрачная жидкость различных оттенков желтого цвета (в зависимости от цвета питательного бульона). Наличие мути указывает на порчу препарата.

Бактериофаги представляют собой препараты, вызывающие растворение (лизис) соответствующих микробов. Эти препараты получают из живых микробов путем воздействия на них специфического лизирующего (бактериофаг) начала, природа ко4 торого и настоящее время еще не является окончательно установленной.

Бактериофаги применяют как для профилактических, так и для лечебных целей.

Широко применяют.в настоящее время дизентерийный бактериофаг; имеются и другие бактериофаги - холерный, брюшнотифозный, стрептококковый, стафилококковый.

Все бактериофаги против кишечных инфекций применяют внутрь.

Бактериофаги представляют собой прозрачную жидкость, цвет которой зависит от присутствия питательного бульона, придающего тот или иной желтый оттенок препарату. Признак негодности - помутнение. Сохраняют так же, как и вакцины.

Общие положения

Многолетний опыт вакцинопрофилактики в борьбе с инфекционными заболеваниями реально подтверждает наличие хороших результатов при условии применения качественных, высокоиммуногенных вакцин и анатоксинов. Для решения этой задачи осуществляют государственный санитарно-эпидемиологический надзор за условиями производства, транспортирования, хранения и использования медицинских иммунобиологических препаратов, в т.ч. вакцин и анатоксинов.

При производстве, хранении и применении вакцин и анатоксинов возникает потребность уничтожения части препаратов, непригодных к применению:

Истекший срок годности;

Нарушение режима «холодовой цепи»;

Нарушение целости ампул (флаконов);

Наличие ампул (флаконов) с неясной или стертой маркировкой;

Изменение внешних свойств, не обозначенных в инструкции (наличие хлопьев, инородных предметов, изменение цветности, прозрачности);

Забракованные серии;

Остатки препаратов во вскрытых ампулах и флаконах после проведения профилактических прививок.

С целью предупреждения инфицирования медицинских работников, осуществляющих уничтожение указанных препаратов, или других лиц, данными методическими указаниями предусматривается унификация требований по уничтожению вакцин и анатоксинов, исключающих также возможность контакта посторонних лиц с необеззараженными препаратами при удалении их на свалки твердых бытовых отходов.

Уничтожение непригодных к использованию вакцин и анатоксинов осуществляют в организациях по производству медицинских иммунобиологических препаратов, организациях, обеспечивающих хранение и реализацию препаратов, организациях здравоохранения, независимо от организационно-правовых форм и форм собственности, частных медицинских (прививочных) кабинетах, в которых проводят профилактические прививки.

В методических указаниях учтены требования нормативно-методических документов Минздрава России.

Настоящие методические указания устанавливают принципы уничтожения различных видов вакцин: живых, инактивированных, химических, рекомбинантных и др., а также анатоксинов и предусматривают механизм централизованного (в объемах фабричных упаковок) или индивидуального (от одной до нескольких ампул) уничтожения препаратов.

. Классификация вакцин и анатоксинов

С целью предупреждения ряда инфекционных заболеваний в организациях здравоохранения широко применяют различные вакцины и анатоксины. Их различают по технологии приготовления.

Живые вакцины - изготовляют на основе антигенов возбудителей инфекционных заболеваний, аттенуированных в искусственных или естественных условиях. Эти вакцины не вызывают клинической картины заболевания, но способны формировать стойкий иммунитет.

Живые вакцины применяют для профилактики бруцеллеза, гриппа, кори, лихорадки Ку, желтой лихорадки, эпидемического паротита, полиомиелита, сибирской язвы, туберкулеза, сыпного тифа, туляремии, чумы, оспы, краснухи.

Инактивированные вакцины - корпускулярные (цельновирионные) вакцины, представляют собой бактерии или вирусы, инактивированные химическими или физическими факторами или обоими факторами вместе. Для их приготовления могут быть использованы вирулентные штаммы микроорганизмов или аттенуированные штаммы.

Применяют для профилактики бешенства, брюшного тифа, гриппа, клещевого энцефалита, холеры, лептоспироза, гепатита А, сыпного тифа, герпеса, менингококковой инфекции, полиомиелита, коклюша.

Химические вакцины - представляют собой компоненты, извлеченные из микробной клетки, определяющие иммуногенный потенциал последней. В технологии приготовления этих вакцин используют различные физико-химические методы.

Применяют для профилактики менингококковой группы А и С, пневмококковой и гемофильной инфекций, холеры, брюшного тифа. К категории химических вакцин могут быть отнесены и субъединичные вирусные вакцины, в частности гриппозная субъединичная вакцина.

Рекомбинантные вакцины - получают при клонировании генов, обеспечивающих синтез необходимых антигенов, введении этих генов в вектор, введение векторов в клетки-продуценты (вирусы, бактерии, грибы и пр.).

Эти вакцины безопасны и достаточно эффективны, широко применяется рекомбинантная вакцина против гепатита В.

Анатоксины - представляют собой бактериальные экзотоксины, обезвреженные длительным воздействием формалина при повышенной температуре. Анатоксины обладают относительно низкой реактогенностью.

Применяют для профилактики дифтерии, столбняка, гангрены, ботулизма, холеры, стафилококковых и синегнойных инфекций.

. Общий порядок уничтожения непригодных к использованию вакцин и анатоксинов

Настоящие методические указания определяют порядок и мероприятия по обеззараживанию и удалению или сжиганию непригодных к использованию вакцин и анатоксинов.

В зависимости от вида вакцин и анатоксинов с учетом технологии приготовления разработаны подходы к их уничтожению. Прежде всего это касается живых и инактивированных вакцин и анатоксинов.

Уничтожение этих препаратов проводят в централизованном или индивидуальном порядке.

4.1 . Уничтожение вакцин и анатоксинов в централизованном порядке

* Допускаются другие режимы в соответствии с инструкциями для стерилизаторов нового поколения.

(указать причину уничтожения)

Наименование медицинских иммунобиологических препаратов

________________________

Количество (доз)____________________________________________________________

Лица, ответственные за проведение и безопасность уничтожения препарата _________

___________________________________________________________________________

___________________________________________________________________________

(члены производственно-технической комиссии)

Место уничтожения__________________________________________________________

Порядок и способ уничтожения________________________________________________

___________________________________________________________________________

___________________________________________________________________________

(наименование организации)

и пришедших в негодность по причине

___________________________________________________________________________

(указать причину)

Наименование препарата

___________________________________________________________________________

___________________________________________________________________________

Номер серии _______________________________________________________________

Срок годности______________________________________________________________

Количество (дозы)___________________________________________________________

Дата уничтожения___________________________________________________________

Место уничтожения_________________________________________________________

Способ уничтожения________________________________________________________

___________________________________________________________________________

Подписи: Председатель комиссии_____________________________________________

Члены комиссии___________________________________________________

___________________________________________________

___________________________________________________

___________________________________________________

Вопросы для подготовки
Вакцины, их назначение, виды вакцин.
Способы приготовления корпускулярных (живых и убитых), химических вакцин и анатоксинов.
Принципы применения вакцин.
Аллергены, их получение и использование.
Иммунные сыворотки, их назначение.
Способы получения лечебных и диагностических сывороток.
Методы титрования антитоксических и антимик-робных сывороток.
Предупреждения осложнений при введении сывороток.
Стандартизация, контроль и хранение биологиче-ских препаратов, предназначенных для лечения и профилактики инфекционных болезней.
Вакцины
Вакцины. Вакцинами называют препараты, используемые для активной иммунизации людей и животных с профилактическими и лечебными целями. Различают живые, убитые, химические вакцины и анатоксины.
Живые вакцины приготавливают из специально полученных штаммов микроорганизмов с ослабленной вирулентностью и полноценными иммуногенными свойствами. Живые вакцины используют для профилактики бешенства, желтой лихорадки, полиомиелита, гриппа, кори, паротита, сыпного тифа, сибирской язвы, чумы, туляремии и др.
Убитые вакцины представляют собой взвесь убитых (инактивированных) микроорганизмов в изото-ническом растворе хлорида натрия. Их готовят из штаммов микроорганизмов, обладающих максимально выраженными иммуногенными свойствами. Для инактивации вакцин используют разные методы - нагревание, УФ-лучи, ультразвук, химические вещества (формалин, фенол, спирт и др.) - К убитым вакцинам относятся вакцины про- тив брюшного тифа, паратифов, холеры, коклюша, гриппа, клещевого энцефалита, полиомиелита и др.
Химические вакцины готовят из отдельных антигенных фракций микробных клеток с применением различных методов, направленных на разрушение клеток и извлечение из них тех или иных компонентов. Примером химической вакцины может служить брюшнотифозная вакцина, состоящая из О-антигенов (соматических глико-, липопротеинов) возбудителей брюшного тифа, сорбированных на гидрате оксида алюминия. При введении в организм химические вакцины благодаря хорошей растворимости и относительно низкой молекулярной массе быстро метаболизируются и выводятся из организма, не обеспечивая длительного иммуногенного раздражения. Поэтому к ним обычно добавляют вещества, удлиняющие время всасывания: гидроксид алюминия, алюминиево-калиевые квасцы, а также хлорид кальция, минеральные и животные масла и др.
В последние годы привлекают все большее внимание рибосомальные вакцины, представляющие собой фракч цию рибосом, которые получают из разрушенных микробных клеток путем ультрацентрифугирования. Эти вакцины обладают высокой превентивной активностью и менее токсичны по сравнению с соответствующими вакцинами, приготовленными стандартными методами. Однако рибосомальные вакцины, обладающие протектив- ными свойствами, удается получить не из всех патогенных микробов. Хорошие результаты получены с рибосо- мальными вакцинами из шигелл и сальмонелл, напротив, вакцина из чумного микроба оказалась неэффек-тивной.
Анатоксины - обезвреженные микробные экзо-токсины. Для обезвреживания к экзотоксину (фильтрату токсигенной культуры микроорганизма) добавляют 0,3- 0,4% формалина и выдерживают его при 37°С от 18 до 32 дней (метод Рамона). При этом токсин утрачивает токсичность в связи с блокировкой его токсофорных групп, но сохраняет в стабильном состоянии участок молекулы, ответственный за его антигенность и иммуноген- ность. Анатоксины очищают от балластных белков и ад-сорбируют на депонирующих носителях (гидроксид алюминия, фосфат алюминия и др.). В настоящее время выпускают столбнячный, дифтерийный, ботулинический и другие анатоксины, которые используют для создания активного антитоксического иммунитета.
В зависимости от количества входящих в вакцину микробных видов различают моно-, ди-, три- и т. д. и поливакцины. Ассоциированные вакцины готовят из антигенов различных бактерий и анатоксинов. Например, ассоциированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС) содержит убитые бактерии коклюша, дифтерийный и столбнячный анатоксины, адсорбированные на гидроксиде алюминия.
Вакцины в основном применяют для профилактики инфекционных болезней и лишь иногда используют для лечения, например дизентерии, бруцеллеза. В лечебных целях используют также аутовакцины - особый вид вакцин, который готовят из микроорганизмов, выделенных от определенного больного, и используют для лечения только данного больного. Чаще аутовакцины используют для лечения хронических заболеваний, вызванных стафилококками и другими бактериями.
Консервация вакцин. Убитые вакцины консервируют добавлением 0,25% фенола или мертиолата в соотношении 1: 10 ООО. Живые вакцины стабилизируют путем лио- филизации (высушивания из замороженного состояния в условиях вакуума).
Хранение вакцин. Вакцины хранят в запаянных ампулах или флаконах, снабженных этикетками. На этикетках должны быть указаны институт, изготовивший вакцину, название, серия вакцины, номер государственного контроля, срок годности. Срок годности устанавливают для каждого вида вакцины отдельно. Сухие вакцины (лиофилизированные) имеют больший срок годности, чем жидкие. Например, сухая антирабическая вакцина имеет срок годности 2-3 года, а жидкая - 5 мес. Срок годности анатоксина 1-3 года. Хранят вакцины в сухом, защищенном от света месте при температуре 2-10°С. Перед употреблением сухую вакцину разбавляют изотоническим раствором хлорида натрия или дистиллированной водой с соблюдением всех правил асептики. Количество жидкости, добавляемой к вакцине, должно быть указано в прилагаемом к вакцине наставлении.
Контроль вакцин
Все вакцины проходят государственный контроль. Убитые, химические вакцины и анатоксины проверяют на стерильность путем посева на питательные среды. От каждой партии вакцины отбирают не менее 10 ампул или 10 флаконов. Флаконы и ампулы вскрывают стерильно. Посев делают с соблюдением всех правил асеп-тики. Вакцину в объеме 0,5 мл засевают на МПБ, сусло и среду Китта - Тароцци. Посевы выдерживают в термостате 5-8 сут. Отсутствие роста на питательных средах свидетельствует о стерильности вакцины.
Проверку безвредности производят на мышах, кото-рым подкожно вводят 0,5 мл вакцины. Выживание животных при наблюдении в течение 3 дней свидетельствует о безвредности вакцины. Результаты проверки вакцин заносят в следующую таблицу.
Схема контроля вакцин Название Характер Внешний вид Морфология Стериль-ность Безвредность Густота по стандарту
Для проверки иммуногенности вакцины производят иммунизацию чувствительных к данному заболеванию животных, после чего их заражают смертельной дозой соответствующей живой культуры. Процент выживших животных указывает на степень иммуногенности (60- 80-100% выживаемости).
Признаки негодности вакцины: изменение нормального внешнего вида (цвета, степени мутности), наличие плесени, посторонних частиц, комочков, не разбивающихся при встряхивании, нарушение целостности ампулы или флакона, отсутствие этикетки. Сухая вакцина, не образующая при растворении равномерной взвеси, также не пригодна к употреблению.
Корпускулярная вакцина должна содержать определенное количество микробных тел в 1 мл. Густоту вакцины проверяют оптическим путем, используя стандарты, содержащие 5 и 10 единиц мутности. В стандартную пробирку вносят 1 мл испытуемой вакцины и добавляют в нее необходимое количество изотонического раствора хлорида натрия, чтобы степень мутности сравнялась с мутностью стандартной взвеси. По объему добавленного
Таблица 10
Схема постановки реакции флоккуляции
Пробирки Ингредиенты, мл і 2 3 4 5 Дифтерийный анатоксин 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 Антитоксическая 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24 сыворотка, титр.., Водяная баня 40-45°С 45 мин Результат Титр анатоксина
раствора рассчитывают густоту взвеси или титр вакцины, который выражается числом микробных клеток (миллионы, миллиарды) в 1 мл.
Определение активности анатоксина. Активность анатоксина определяют по его способности реагировать со специфической антитоксической сывороткой (табл. 10). Для этой цели применяют реакцию флоккуляции: при смешивании токсина или анатоксина в определенных со-отношениях с антитоксической сывороткой (антитокси-ном) образуется помутнение, а затем выпадает рыхлый осадок (флоккулят). В зоне эквивалентности, т. е. при строгом соответствии количества сыворотки и антигена реакция флоккуляции наступает раньше (так называемая начальная флоккуляция). Эта реакция применяется и для титрования противодифтерийной сыворотки.
Контроль при производстве вирусных вакцин
В связи со спецификой производства вирусных вакцин существуют особые подходы к контролю их качества. Помимо общих для всех вакцин показателей, противови-русные препараты должны контролироваться на отсут-ствие туморогенных свойств. Для этого проверяют отсутствие в них биологически активных макромолекул и посторонних вирусов путем заражения лабораторных животных и куриных эмбрионов. Кроме того, контролируют культуры тканей, применяющиеся для накопления вирус- ного материала. В качестве таких культур используют диплоидные клетки фибробластов, выращенных из тканей легких эмбриона человека. Их культивируют в специальных банках клеток. Банк клеток состоит из ряда ампул, содержащих клетки с установленной генеалогией, ростовыми характеристиками, жизнеспособностью и ка- риологическими показателями; кроме того, должно быть известно, что у них отсутствует признак прививаемости. Помимо клеток человека, используют клетки животных и птиц (кур, кроликов, обезьян). Для этой цели животных разводят в закрытых колониях, свободных от присущих им патогенных агентов. Клетки, полученные от животных из таких колоний, не содержат вирусов-конта- минантов. Важное значение имеет контроль питательных сред, использующихся для культуры тканей. В них дол-жны отсутствовать бактерии, грибы, микоплазмы и по-сторонние вирусы. Для стерилизации этих сред рекомен-дуют использовать гамма-облучение.
Общая схема производства и испытания вирусных вакцин представлена на схеме.
ПРОИЗВОДСТВО И ИСПЫТАНИЯ ВИРУСНЫХ ВАКЦИН

Принципы применения вакцин
Вакцинацию проводят различными путями: накожно (против оспы, туляремии), внутрикожно (БЦЖ), подкожно (против кишечных инфекций), энтерально (живую поливакцину), на слизистую оболочку носа (против гриппа), аэрогенно и комбинированными методами. В последнее время используют безыгольный внутрикож- ный метод. Живые вакцины вводят чаще однократно (против паротита, кори) или с последующей ревакцинацией (БЦЖ, против полиомиелита). Убитые вакцины вводят 2-3 раза с интервалами 7-10 дней. Химические вакцины и анатоксины вводят, как правило, однократно.
Вакцины применяют главным образом для профилак-тики инфекционных болезней. Для лечебных целей вак-цины используют при хронических, вяло протекающих заболеваниях: фурункулез и другие стафилококковые ин-фекции, хроническая гонорея, бруцеллез и др. Лечебный эффект связан со стимуляцией иммунной системы и де-сенсибилизацией организма.
Аллергены
Аллергены - это препараты, которые применяют с целью диагностики соответствующего заболевания, для выявления иммунологической перестройки организма в результате вакцинации или заболевания, а также для определения чувствительности больного к определенным лекарственным средствам. Основные требования к аллергенам- высокая чувствительность и специфичность. Микробные аллергены готовят из фильтратов бульонных культур (туберкулин, бруцеллин, гистоплазмин) или из клеток микроорганизмов аналогично химическим вакцинам. Их контролируют и хранят аналогично другим бактериальным препаратам. Аллергены вводят накожно (проба Пирке) или внутрикожно (проба Манту) в объеме 0,1 мл в ладонную поверхность предплечья. При положительной реакции на месте нанесения аллергена наблюдается покраснение и припухлость.
Самостоятельная работа
1. Приготовление убитой стафилококковой вакцины.Материа- л ы. Суточная агаровая культура микроорганизма; пробирки со средами: МПА, МПБ, сусло-агар, сусло жидкое, среда Китта - Тароцци, бактериальные стандарты, водяная баня.
Постановка опыта. Проверяют чистоту культуры в маз-ке, окрашенном по Граму. Готовят 10 мл взвеси клеток в изотоническом растворе хлорида натрия с содержанием микробных клеток 1 млрд/мл, используя бактериальный стандарт." Прогревают клетки на водяной бане при 70°С. Чтобы проверить стерильность прогретой вакцины, засевают по 0,2 мл вакцины в пробирки со средами (см. с. 117). Посевы на сусле оставляют на 7 дней при 24°С, остальные - при 37°С, после чего оценивают стерильность вакцины.
2. Ознакомление с вакцинами и анатоксинами; титрование дифтерийного анатоксина методом флоккуляции (демонстрация).

Еще по теме Тема 16. МЕДИЦИНСКИЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ.ВАКЦИНЫ, ИХ ПОЛУЧЕНИЕ, КОНТРОЛЬ, КОНСЕРВАЦИЯИ ХРАНЕНИЕ. АЛЛЕРГЕНЫ. ИММУННЫЕ СЫВОРОТКИ,ИХ ПОЛУЧЕНИЕ, КОНТРОЛЬ, КОНСЕРВАЦИЯ, ХРАНЕНИЕ,МЕТОДЫ ВВЕДЕНИЯ: